李承鹏：墙里扔出的一根骨头

前天在微博上看到，把国家和政府当父母，为了不给父母添乱就从不在两会上投反对票的倪萍获得“共和国脊梁”的殊荣，出于对脊梁这根很敏感的骨头理解的不同，大家议论纷纷，我说：倪萍确实是共和国的脊梁，只是患了颈椎病。

我 觉得把国家和政府当父母，是一个很欠的说法。通俗来说国家就是保镳政府就是物管，是纳税人聘来的，可大家显然没跟小区保安和物业喊过父母吧。其次，为不给 保安和物业添乱，哪怕它们做得再差，也深情地不投反对票……这样的逻辑很差劲，除了会导致中国这个小区下水道持续内涝，一定会导致“你到底是为党说话还是 为老百姓说话”这样的励志名言及墓志铭言，教育出更多的软骨头而不是脊梁。所以我反对从不投反对票的倪萍是共和国脊梁，我不认为这么说有什么不对，不为老 百姓说话的代表即使是脊梁也是颈椎病的7，而不是迎风招展的1。

好玩的是出现了很多水军帖子，除了每回都会整编制出现的“大姐好人哪” “谦虚，低调，实在”“大姐像一阵春风化解了人间”知音体（每回都发这些，雇的水军太没创意了），这次增派了很多的“不给国家添乱就是好脊梁，操李全家” “李就是想搞乱中国，操他全家”“我们这个世界，大姐无疑是建设者，搅和者如大眼、奸详、含含之流利用当下的民主宽容无时无刻不在大呼小叫，其实是在捞取 个人的好处!历史上的汉奸大多数都是出自于这种类型的搅和者!”……这时我不笑是很难的，因为大量ID都是刚注册的或只有几篇散文美容帖的，最好玩的是 “大眼明显是故意的，他有私心，想引起领导的注意，他想当人大代表”。

我对水军无所谓，虽然派水军已是笔仗中很土鳖的一招了，可水军多 一点，水涨船高可力保我国航母不至搁浅。操我全家及让我道歉也无所谓，我天天都在向共和国道歉，我家那条柴狗正在发情期也正急着找同类，谢谢舍身帮忙。让 我觉得要写点什么的是，看到倪萍更新了一封给我的信：《李承鹏，你的微博我看了》——

最近我获了两个奖。一个是“全国中青年德艺双馨文 艺工作者”奖，获奖那天组委会安排我接受媒体采访，我婉拒了，我说：“有德有艺是一个文艺工作者应具备的基本条件，不用表扬。”另一个就是昨天你说的那个 奖，我具体获得的是纪念建党90周年•共和国脊梁系列活动“十大杰出艺术成就奖”。我的现场获奖感言是这么说的：和同时获奖的田华老师、刘兰芳老师、张继 刚他们相比，我真的不配拿这个奖，如果能退的话，这个奖我退了吧。我仅是沾了职业的光，又出名又得利的，我知道自己，我会努力的。
其实，无论你怎么说，我都能理解你。圈内我们都叫你李大眼，我还签了本《姥姥语录》托人转给你，并写了这样的话：你的几本书我都看了，散文写得真好，尤其是写张国荣，还有写你的母亲。交换吧，你也看看我的书。
最后我想说，姐姐我从来没觉得自己是脊梁，盼你能理解。

表 面看这是一篇特别谦虚厚道和温暖感动的文章，可透着一种春晚体的假，假装老百姓贴心小棉袄，实是有关部门的铁马甲，假装趴着接地气，其实在琢磨抽掉想翻墙 的梯子。你都不婉拒获德艺双馨奖，却要婉拒采访。都婉拒采访了，可还是要告诉亿万观众“有德有艺是一个文艺工作者应具备的基本条件，不用表扬”。这么裸的 假，我雷鸣般地想起雷锋做好事从来不留名，就是写在日记上。另外一个雷鸣般响起的就是倪萍获奖感言居然是要退掉共和国脊梁奖。多么熟悉的场景，就是这样， 领导每回都说“咳，我真的不想当这个官啊，可群众不答应啊”，倪萍说“哎，我是真不想领这个奖啊，可恐怕退不掉啊”。姐，你退掉它吧，我打赌，真退还是能 退掉的。

我也不认为倪萍提及的那些人配得上共和国脊梁，靠演些红色电影讲些价值观混乱的评书或是导一场耗费民资毫无实用的大型晚会就脊梁了，你说的是蚯蚓的脊梁吗。也别说德艺双馨奖了，我说过我俩唯一的分歧就在德艺双馨的定义，大家都说，苍井空听了，会含泪退役的。

其 实我觉得跟倪萍打笔战没意思，也不想绑架倪萍去反对什么。我只是觉得派水军这做法太不脊梁了，我要告诉倪萍：这个国家，因为种种原因，你我都是戏子，且不 幸是三四流的戏子，举国都被一根看不见的线牵着在演皮影。可蹩脚戏子中还是有高下之分的：知道自己在演戏的，和忘了自己在演戏的。你碰巧就属于那种经典入 戏太深的，你真相信靠煽情的眼泪就清涤了街市上的耻辱，靠略颤的尾音就共鸣出一个幸福大家庭的心声。可我要告诉你，那是你的幻觉。太多的人民上不起学找不 到工作喝着毒牛奶住着高价房，老了火化时却成得道高僧，因为烧成灰后闪现出好多三聚牌舍利子……其实你也不是看不到，开始你是装看不到，后来你就真看不到 了。你盈眶的泪，已自顾自凝化成一副美瞳隐形眼镜，看什么都叫幸福、安康、合家欢乐、举国欢腾。

倪萍是个好人，可这就是好人倪萍现象。 这个国家总有这么一群人，他自己装看不见，后来真看不见，不仅他看不见，还不许别人看得见。他从不投反对票，他唯一投的反对票就是，反对别人投反对票。因 为他凭借这个方法赚到很多，上面有大佬罩着，下面有脑残欢呼。到后来，他不再是当初那个只是有些傻气的人，而成为精明的帮凶，他其实确知自己要什么，怎么 要。动作娴熟，表情纯真，下手狠毒，倘若你发现这些技巧，他会深情地望着你说：呀，我只是一个孩子，想帮父母操点心。

问题是，这么多年，都姥姥了，还装孩子，不烦吗。

花 了一辈子演乖孩子，而且高龄之际竟演出这么清纯的一嗲，所以好人倪萍不是脊梁，其实是是伎俩，是化骨绵掌，因为这么一伎俩，高堂之上本有些心虚的父母就坦 然了：这样一群代表民意的脊梁，油价就不用降了，房价不算太高，税费还是嫌有些低哈，总之一切都是发展中必然遇到的问题嘛。还有一些小棉袄式絮叨的话，比 如教我厚道的。我觉得最厚道的是帮人民说话，而不是成为两会一枚永恒不倒的“同意牌”假肢。教我善良的，这国家的人民被善良害过几千年了，生活中哪个教你 善良的人没害过你。以及倪姐夸我散文写得好张国荣写得好，这只是中文系的基本功，不值一提，且这国家已让我没心情写散文，我写的《李可乐抗拆记》比所有的 抒情散文都好。因此交换彼此的书就不必，我俩不是同一路人，你我的区别，就是《李可乐抗拆记》和《姥姥语录》的区别，这不是两本书，是两个中国。不如你带 我去姥姥的菜市场，我带你去拆迁现场，看我俩谁先崩溃，以后你在两会上反对一次父母，我在文章里表扬一次父母。倪，敢？

最后，我对脊梁是这样看的：人体最重要的中枢神经系统，实现大脑指挥屁股。如果屁股指挥大脑，不叫脊梁，当了一辈子代表连句有担当的话都不敢说，这脊梁，顶多是野夫说的一根墙里面扔出来的骨头。

你敢保证每回墙里扔的都是骨头？我知道的一个真实故事，那人一直在等骨头，等啊深情地等，结果扔出来一砖头。

祝美国国庆日——自由民主的伟大斗争日, （1944年7月4日《新华日报》社论）

今天是美国国庆日。1776年7月4日，美国人民在华盛顿，杰斐逊等民主主义伟大先驱的领导下，宣布了民族的独立。美国的独立是处于这样的历史条件：它不 但代表美国的民族利益，而且代表美国的民主利益，代表美国要求自由的多数人民而与美国当时的保皇党——大地主、大商人、职业宗教家的集团相对立，这样，领 导独立战争的华盛顿就不但完成了民族任务，同时也完成了政治上经济上的民主任务，而被选举为人类历史上破天荒第一次的民主共和国的第一个大总统了，同样， 杰斐逊总统，不但是独立宣言的起草者，同时也是消灭大地主法案、思想自由法案、全民教育法案、禁止输入奴隶和限制奴隶法案的起草者。这个事实，就说明了美 国独立运动的丰富历史内容，也就说明了美国为什么成为资本主义世界最典型的民主国，而且直到今天，也与社会主义的苏联成为民主世界的双璧。

马克思、恩格斯、列宁、斯大林，这些社会主义的伟大思想家和行动家，对于美国的战斗民主主义及其在世界史上的进步作用，从来都是给予最高度评价的。美国的 战斗民主主义有其光荣的历史传统，美国的独立不是唾手可得，是在八年的对外战争与更长期的对内斗争中完成的。列宁说，这是历史上“最伟大的，真正解放和真 正革命的战争”之一；正因为如此，美国的民主派领袖杰斐逊和杰克逊，美国民主党的这两个创造者，在他们的斗争中甚至被他们的政敌指为“共产主义者”和“赤 化分子”。美国穷木工的儿子林肯，他所领导的黑奴解放战争被马克思称为“开始了劳动阶级兴起的新时期”，而在实际上，他与马克思所领导的美国共产主义者和 欧洲共产主义者也是合作的，他曾委任美国的共产主义者担任他的军官，这样，他就更有理由被当时的反动派指为“共产主义者”和“赤化分子”了，以至最后这些 顽固分子竟然暗杀了他……

民主的美国已经有了它的同伴，孙中山的事业已经有了它的继承者，这就是中国共产党和其他民主的势力。我们共产党人现在所进行的工作乃是华盛顿、杰斐逊、林肯等早已在美国进行过了的工作，它一定会得到而且已经得到民主的美国的同情……

7月4日万岁！

民主的美国万岁！

中国的独立战争和民主运动万岁！

打倒日本帝国主义！

Single Molecule Pulldown can be optimized with Allele’s Fluorescent Proteins

Originally published at AlleleBlog:

In the recent Nature paper, “Probing cellular protein complexes using single-molecule pull-down”, published May 26, 2011, researchers at the University of Illinois at Urbana-Champaign outline their findings for a new method for visualizing protein complexes through a single-molecule immunoassay which combines an antigen capturing chip and TIRF Microscopy. The SiMPull method captures protein complexes and the captured complexes are then visualized with fluorescent dyes or fluorescent protein tags. This is accomplished by using a microscope slide covered with biotinylated polyethylene glycol (PEG) and streptavidin bound to biotinylated antibodies. For single molecule visualization, multicolor labeling provides differentiation of subcomplexes and configurations.

The study includes two validation experiments, where study team members tagged their chosen complexes with YFP, in order to estimate YFP concentration after pulldown and subsequent imaging. They were then able to determine stoichiometric information in human kidney cells, from the isolated monomeric or dimeric YFPs, which exhibited the one and two-step decay responses.

Additionally, in another validation experiment, team members chose to use protein kinase A (PKA) because it’s two catalytic and two regulatory subunits separate in the presence of cAMP. This was accomplished by labeling the catalytic subunits of protein kinase A with YFP and the regulatory subunits with mCherry fluorescent protein. They then used a two-color SiMPull to pull down PKA. After pull-down they imaged the PKA in the presence of cAMP and without cAMP present. The YFP and mCherry signals fluoresced together, demonstrating that the catalytic and regulatory subunits were still attached to eachother. The YFP and mCherry signals did not correlate in the presense of cAMP, reaffirming the fact that the two subunits disassociate in the presence of cAMP. 

Unlike other single-molecule pulldown techniques, the SiMPull does not require purified proteins. It also only requires about 10 cells of sample for protein pull-down and analysis, while traditional Western Blots require about 5000 cells. Moreover, This two-color SiMPull method could be further optimized yielding higher resolution overlay when used in combination with Allele’s mTFP1 and LanYFP, the brightest fluorescent proteins on the market.

The full article can be found at http://www.nature.com/nature/journal/v473/n7348/full/nature10016.html

New Product of the Week: High quality Anti-FLAG Monoclonal Antibody for detection or pulldown, ABP-MAB-DT006, $219/100ug.

Promotion of the Week: save 5% on all of our pre-packaged viruses. Our pre-packaged viruses are all titered at 10^8th or higher, and packaged in 5 tubes for your convenience. To redeem this offer email the code PREPACK to abbashussain@allelebiotech.com.

Making a difference for those in need

From AlleleBlog:

This month 4 major pharmaceutical companies, GlaxoSmithKline, Merck, Johnson & Johnson and Sanofi-Aventis; all agreed to lower the cost of critical vaccines for developing countries.  They have all done this as a part of the international vaccine alliance GAVI.  The companies have severely slashed the prices of vaccines for diseases like rotavirus, a disease that isn’t prevalent in developed countries but causes more than half a million deaths per year.  The model GAVI uses is one where vaccine costs are drastically lowered in developing countries, and this cost is offset by raised vaccine prices in developed countries.
 

GlaxoSmithKline has also reported that they are very close to developing an anti-malaria vaccine, which would be the first of its kind.  This clearly shows a dissent from common pharmaceutical business practice, since Malaria is virtually wiped out in most developed countries.  GSK has no hope of recouping costs for this vaccine by having patients in developed countries pay a premium for vaccination; but this has not deterred their efforts.  Rather they have pledged to make on a 5% profit of the sale of the vaccine which will go toward future anti-malaria drug research.
 

Pharmaceutical companies are often viewed in a negative light for their practice of charging a premium for new drugs.  However, the research, development, trials, and further clinical trials required to bring a drug or vaccine to market are all very costly, somewhat justifying a new drug’s high cost.  Unfortunately this means there is no market for new drugs to combat diseases in developing countries as they cannot afford to compensate drug companies accordingly for their development costs.  This is the key flaw in GAVI’s model, so it is great to see GSK is unhindered by this fact.

Everyday people who work in the biotech field strive to make a difference and help humanity through their research.  Through the work of organizations like GAVI this research can ideally be utilized by all, and not just by those who can afford it.
 

New Product of the Week: High quality Anti-GST Tag (GST.B6 / G2R) Monoclonal Antibody for detection of GST-fusion proteins, ABP-MAB-GT003.

Promotion of the week:  Save 10% on Allele-In-One Mouse Tail Direct PCR buffer when you email promo code GENOTYPENOW to oligo@allelebiotech.com

张洁平: 中国90后先锋改变中国 (节选）

看了下文，感觉北大清华还有未死的精神，甚慰，加惭愧--想起我同代北大人中仍认为“政权是国家机器，维护少数利益集团的利益是应该的”、以及没有正义只有利益、麻烦都是互联网惹出来的（translate: 自焚、钱云会、邓玉娇等等不知道就没事了）的相当普遍的认知水平，不得不感叹时代已经甩开我们前行了。为90后喊一声好！

-----------------------------------------------------------------------------------------
中国九零后一代大学毕业正走向社会，其中的精英如清华蒋方舟和北大孙宇晨脱颖而出，自信、独立、忠于自己欲望；网络是他们与生俱 来的工具，在虚拟社会中单打独斗、抱团抗敌，在社交网络中点对点漂移。他们被视为「不是另一代人，而是另一种人」；在武汉向「防火墙之父」扔鞋子的「寒君 依」，在广州反对地铁统一颜色的陈逸华……他们敢于挑战权威和现有秩序，以不同方式塑造中国未来。

一九八九年十月出生的清华女生蒋方舟，言谈之间，不动声色地在身后划了一条线，线的这一边是自己，那一边是比她晚了两个月出生的孩子：「九零后」。

这 个七岁开始写作，九岁出版第一本书，十一岁写长篇小说，在前辈的打量目光中长大的少年作家，偷笑着说，自己终于等来了「九零后成长为一个词」！而她，这时 就可以「忙不迭跳到对岸，站在双手环胸的那一排老朽里，对彼岸的九零后表示出好奇、不解、不满，其中也有一些怵然的敬畏和深切的怜悯……」

可是，用数字来分隔世代看起来有些傻——等等，你没有看出来吗？蒋方舟同学显然是在开一个玩笑啊。这玩笑很符合九零后的水平：有对彼岸「老朽」们的轻微嘲讽，也有与顶着标签的同龄人们的切磋琢磨、惺惺相惜。

怎么看八零后的形象代言人韩寒？蒋方舟说，韩寒很不错，但「没文化」了一点。「他距离真正的精英阶层还很远。」她很直白地讲。

北 京大学大四学生孙宇晨，网络上错写他生于一九八八年，他很介意：「显然不能啊！我是九零年生的，如假包换的九零后啊！」他有接近四点零的本科成绩GPA， 组织过学生社团，竞选过学生会主席，是人人网（类Facebook的大学生中文社交网络）的知名写手，他刚刚揭批了「北大会商制度」，笔下鲜明自由主义气 息的时事评论广受同龄人追捧——无论从哪个方面来看，孙宇晨都称得上足够优秀的北大精英。刚刚拿到美国宾州大学的录取通知书，他已在自己的网络签名档上添 上：美国宾州大学硕士。他从不掩饰自己的优秀。「不选我，他们选谁啊？」聊到竞选学生干部时他会冒出这样的话，带着点调侃，但底气十足。

孙宇晨对韩寒的评价是「精神领袖」。「我小时候还是受韩寒很大影响的。他是我们这一代人的精神领袖，绝对的。」他说，他心目中还有一个精神领袖，是在他出生前一年已成名的北大师兄——王丹。

在说了许多对这两人的印象及他们对他的影响后，孙宇晨补充了一句：「当然，领袖不需要很优秀，领袖只要很像领袖就可以了。」余韵悠长。。。

Generate mouse and human iPS cells with transfected mature miRNAs

http://allelebiotech.com/blogs/2011/06/generate-mouse-and-human-ips-cells-with-transfected-mature-mirnas/

In last week’s blog we discussed generation of induced pluripotent stem cells (iPSCs) with miRNAs expressed from lentivirus. To take it a step further, synthetic, mature miRNAs can be used to avoid the use of viral vectors. Sure enough, Miyoshi et al. published a paper online a few days ago showing that by transfecting 6 miRNAs at 48 hour intervals, they were able to create iPSCs from mouse and human somatic cells. The efficiency is comparable to retrovirus-mediated OSKM factor over-expression (Yoshida et al.), and therefore lower than lentivirus-mediated miR302/369 expression (Anokye-Danso et al.).

In the study of using mature miRNA for obtaining iPSCs, the researchers transfected miRNAs mir200c, mir302s and mir-369 into tissue cultured cells and achieved reprogramming results. Interestingly, only mir302s are common between this study and that with lentivirus-mediated miRNAs by Anokye-Danso et al. There is no current explanation as to why mir-367, which was shown to be required by Anokye-Danso et al., did not seem to be needed in the mature miRNA transfection experiments. Perhaps a level of redundancy among miRNAs, combined with their broad target range and relatively low specificity, allow some of the miRNAs to be interchangeable when used for reprogramming.

Finally, neither of these two recent miRNA-iPSCs works was the first to demonstrate that miRNAs can initiate or facilitate reprogramming. As early as 2008, Lin et al. showed that mir302s could induce pluripotency in a dose-dependent manner by using tet-induced lentivirus expression. They further illustrated that the underlying mechanism is likely through mir302s’ regulation of epigenetic regulators AOFs and other similar factors.

Promotion of the week: Promotion of the week: 10% off on all fluorescent proteins. To redeem, email oligo@allelebiotech.com along with PROMO code: JELLYFISH. See weekly promotions on Facebook.

杨振宁称 结束一党专政不利科研

2011年06月08日

有东方诺贝尔奖之称的「邵逸夫奖」第八届得奖名单昨日公布，七名获奖学者均来自民主的美国和欧洲国家，连续两届未有华人或中国学者得奖。邵逸夫奖评审会主席杨振宁不认同民主是科学发展的元素，又指若中国共产党结束一党专政，将会出现十年整顿期，拖慢中国科学发展。

 

http://www.youtube.com/watch?v=ELk5-mIVDiY&feature=player_embedded 

Wow, now I don't feel so bad about my Beida scientist classmates, after spending most of their adult lives in the US, singing praises to the dictatorship and blaming everything freedom and democracy have to offer. Well, there is still some difference between Yang and my generation's dictatorship-lovers--Yang gets paid now by the dictatorship, whereas the young do not.